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淺析放射免疫法試劑盒方法原理

更新時間:2020-07-23點擊次數:1396
   放射免疫法試劑盒方法原理:
  該方法以放射免疫測定的競爭性結合原理為基礎。標準品和未知樣品包被管中一起溫育,抗體包被于試管底部。溫育后將管內物質吸出或倒出,計數。在1~60μg/dl 范圍內,以5 個血清標準坐標準曲線,未知樣品值可從標準曲線中查得。整個反應在包被管中進行。對于血清,尿液或血漿樣本來說,未分離樣本的稀釋,蛋白質的變性或提取步驟是必須的。除了非提取尿皮質醇分析外,該藥盒也可用于尿液中游離皮質醇的測定。首先用亞甲基氯化物提取尿液中皮質醇,將提取物的一個等份式樣在包被管中直接脫水(試驗證明如果使用的亞甲基氯化物,不會有損于包被管)。為確保樣本中含有適當水平的蛋白質,向每個包被管中加入10μl 皮質醇血清空白,其余測定過程同血清,血漿和非提取尿皮脂醇。應監控使用亞甲基氯化物提取尿中皮)
  放射免疫(RIA)的優點
  放射免疫分析具有許多其它分析方法*的優點。它既具有免疫反應的高特異性,又具有放射性測量的高靈敏度,因此能準確測定各種具有免疫活性的極微量的物質。
  ⒈靈敏度高一般化學分析法的檢出極限為10~10g,而RIA通常為10ng(納克,ng)、10pg(皮克,pg),甚至10fg(飛克,fg)、10ag(阿克,ag)。
  ⒉特異性強由于抗原—抗體免疫反應專一性強,所被測物一定是相應的抗原。良好的特異性抗體,能識別化學結構上非常相似的物質,甚至能識別立體異構體。
  ⒊應用范圍廣據不*統計,目前至少已有300多種生物活性物質已建立了RIA。它幾乎能應用于所有激素的分析(包括多肽類和固醇類激素),還能用于各種蛋白質、腫瘤抗原、病毒抗原、細菌抗原、寄生蟲抗原以及一些小分子物質(如環型核苷酸等)和藥物(如毛地黃甙等)的分析,應用范圍還在不斷擴展。近年來由于小分子半抗原制備抗體的技術有很大的發展,有人預測幾乎所有的生物活性物質,只要其含量不低于RIA的探測極限,都可建立適當的RIA法。
  ⒋操作簡便RIA所需試劑品種不多,可制成配套試劑盒;加樣程序簡單一次能分析大量標本,標本用量也少;反應時間不長;測量和數據處理易于實現自動化;RIA屬體外分析技術,對患者無任何輻射危害。
  放射免疫法試劑盒有三大主要要素 :標記物、標準品和抗體。此外 ,質控血清也很重要 ,是否滿足質控血清的要求是簡便、直接的檢驗試劑盒可靠性的條件。當然 ,還有一些輔助組分 ,如分離劑、緩沖液等試劑也不能忽視。

TEL:22-83726755

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